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      全自动电位滴定法测定疫苗佐剂羟值

      发布时间:2025/12/8   点击次数:190
       
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      一、前言

      佐剂是疫苗的一种添加剂,当它先于抗原或与抗原混合注入机体后,能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型,属于非特异性的免疫增强剂。随着现代生物技术和基因工程技术的迅速发展,针对不同疾病已开展了各种新型基因工程疫苗的研制,佐剂尤其是新型免疫佐剂的研究就显得尤为迫切。

      在标准 T/CVDA02《复合矿物油动物疫苗佐剂》中,对于佐剂的质量检测中有明确规定测定羟值含量,本方法参考其中的检测方法制定了运用电位滴定检测的方法。该方法检测方便,减少了人为判断指示剂颜色对结果的误差影响,增加了检测精确度,并且提高了检测效率,解放操作员的双手。

      二、仪器与试剂

       

      2.1、仪器

      JH-T6 全自动电位滴定仪,PH 复合电极,水浴锅,分析天平等。

       

      2.2、试剂

      酰化试剂(取对甲苯磺酸 14.4g,  置干燥的 500ml  具塞锥形瓶中,加醋酸乙酯 360ml,振摇使溶解,缓缓加入醋酐 120ml  摇匀,密塞,放置 3  日后备用),吡啶-水(35),氧化钾标准滴定液(1mol/L)。

      三、实验方法

      3.1、样品检测

      准确称取 2g 左右样品,置于滴定杯中,加入 5mL 化试剂,封口膜密封,轻轻摇动至溶解。置于 50水浴加热 25min ,放冷,加吡啶-水(3520mL 5 分钟后用氢氧化钾标准滴定液(1mol/L), PH 合电极为工作电极,在JH-T6上进行滴定至终点。同时做空白实验。

      设定滴定仪参数如表 1 所示:

       1 滴定参数设置

      滴定模式:

      动态滴定

      最小添加体积

      0.02mL

      电极平衡时间:

      4s

      预搅拌时间:

      60s

      电极平衡电位:

      1mv

      滴定速度:

      标准

      结束体积:

      10mL

      相关系数:

      12.69

      电位突跃量:

      200

      补液速度:

      5

      搅拌速度:

      7

      滴定前平衡电位:

      10mv


       

      3.2、图谱测试示例

      image.png

       

      四、结果与讨论

       

      4.1、实验结果

       

      实验结果如表 2 所示:

       2 测试结果

       

       

       

      样品批号

       

       

      样品序号

       

      样品质量/g

      滴定液浓度(氢氧化钾) /(mol/L)

       

      滴定体/mL

       

       

      羟值(mg/g)

       

       

      平均值

       

       

      20211201

      空白

      /

       

       

       

       

       

      1.01838

      26.225

      /

      /

      1

      2.01652

      25.475

      21.249

       

       

      23.301

      2

      2.01019

      25.386

      23.802

      3

      2.01160

      25.350

      24.851

       

       

      20220101

      1

      2.02788

      25.365

      24.229

       

       

      24.335

      2

      2.09250

      25.326

      24.545

      3

      2.03595

      25.361

      24.231

       

      4.2、结论

       

      本次测定的动物疫苗佐剂的羟值均小于参考标准要求中的 25mg/g),测试结果重复性良好,满足检测要求。

      参考文献

       

      [1] T/CVDA02 复合矿物油动物疫苗佐剂[ S ].


       
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